+

بخشی از متن : 

Hemoglobino Pathies

مقدمه

زمینه های عمومی : توصیف گروه بیماری

Hbp ها رایج ترین تخریبات منوژنیک را تشکیل می دهند. این تخریبها در اثر جهش هایی که بر روی ژنهای سنتز کننده زنجیره های Hb اثر می گذارد ایجاد می شود و احتمالا سنتز را کاهش می دهند (آنمی همولتیک یا پلی ساتیمی یا ندرتاسیانوزیس)

جهش های تالاسمی ها و تنوعات همو گلوبین غیر فعال باعث تولید طیف وسیعی از درجات شدیدی از اختلالات متفاوتی را ایجاد می کند .

چهار طبقه تداخلی وابسته به موقعیت های بیماری سخت وجود دارد که برای تشخیص آن مشاوره های ژنتیکی  و تشخیص بیماری های والدین تاثیر دارد .

a تالاسمی ماژور ( هم ارثی یعنی پدر و هم مادر و یا جهش های تالاسمی)

b بیماری سیکل سل مثلا Hbs/c ، Hbs با تالاسمیا ، تداخلات Hbs/D در Punj ab یا Hbs/o عرب C تالاسمی HbE که در اثر هم ارثی جهش های تالاسمی با HbE است .

1. d) سندرم hjdrops.foetalis ( حالت هموزیگوت تالاسمی . ) و ندرتا سندرم HBH .hjdrops.foetalis

در بیشتر جمعیت ها سندرم تالاسمی و هموگلوبینوپاتی ها وابسته به آن بیشتر مطرح هستند. زیرا فرم های سخت رایج تر است و به معالجات مادام العمر نیاز دارد. فرم تالاسمی هموگلوبین با رتس هیدروپس فتالیس متمایز با زندگی بعد از تو لداست اگر چه شناخت والدین (تشخیص) همیشه برای اجتناب از عوارض توکسمی سخت که اغلب در حاملگی با هیدرو پس فتوس پدید می آید تاثیر دارد .

ژن های و جهش های مولد بیماری :

Hb اصلی در بزرگسالان HbA است. تترامری که از دو زنجیره آنها و دو زنجیره بتا تشکیل شده است.

ژن هایی که این زنجیره گلوبین را کد می کند روی بازوی کوتاه کروموزوم ((۱۱)) است طوری که خوشه های ژنی نامیده می شود و این خوشه های ژنی زنجیره های گلوبولینی را که بر روی بازوی کوتاه کروموزوم ۱۶ قرار گرفته است کد می کند بیشتر از ۱۸۰ جهش موکد تالاسمی را شرح داده اند که اکثر آن جهش های نقطه ای است.

بیشتر از ۸۰ جهش تالاسمی را گزارش کرده  اند که اغلب آن مستلزم حذف از درون خوشه های ژنی است.

علاوه بر آن بیشتر از ۸۰۰ جهش که باعث اختلالات ساختاری می شوند شرح داده شده اند.

طبقه بندی Hbp ها: به طور کلی پنج گروه اصلی از Hbp ها وجود دارد.

1. I. Hbp های ساختمانی هنگامی اتفاق می افتد که جهش ها با تغییر دادن توالی aa یک زنجیره گلوبین، ویژگیهای فیزیولوژیک Hb تغییر یافته را عوض کرده و اختلالات بالینی مشخصی را به وجود می آورند. Hb های تغییر یافته مرتبط با این بخش به طور غیر طبیعی پلیمریزه می شوند مثل آنچه که در کم خونی سلول داسی دیده می‌‌شود یا میزان حلالیت یا میل ترکیبی آن با اکسیژن تغییر می کند.

II . سندرم های تالاسمی ناشی از وقوع جهش هایی هستند که تولید یا ترجمه mRNA گلوبین را دچار اختلال می نماید و منجر به بیوسنتز معیوب زنجیره گلولبین می شود ناهنجاری های بالینی به تامین نشدن Hb کافی و عدم تعادل در تولیدزنجیره های منفرد گلوبین نسبت داده می شود که موجب تحریک زودرس اریتروبلاست ها و گلبولهای قرمز می شود تالاسمی در اصل Hbp نیست یعنی اختلال ساختمانی وجود ندارد.

III . واریانت های Hb تالاسمیک که دارای ترکیبی از ویژگیهای تالاسمی (مانند بیوسنتز غیر طبیعی گلوبین ) و Hbp  های ساختمانی مانند یک توالی غیر طبیعی aa است.

1. IV. باقی ماندن ارثی Hb جنینی (HPFH) با سنتز سطوح بالایی از Hb جنینی در دوران بزرگسالی مشخص می شود.
2. V. Hbp های اکتسابی شامل تغییرات ملکول Hb به وسیله سموم ( مانند مت Hb اکتسابی ) و سنتز Hb غیر طبیعی (مانند تولید مقادیر بالای HbF در پرولوسمی و تالاسمی آلفا در اختلال میلو پرو لیفراتیو می باشند .

انواع Hbهای نرمال و غیر نرمال:

همو گلوبینهای نرمال:

HbA: Hb نرمال تولید شده بعد تولد با فرمول (a₂b₂)

HbA2 : کمتر از ۳۰% سلول های قرمز بعد تولد را تشکیل می دهد. (a₂d₂)

HbF : Hb عمده در طول دوران جنینی است. a₂₂

ژنهای Hb های A و F کاملا به هم وابسته اند و در خوشه های ژنی مشابه روی کروموزوها ۱۱ واقعند . تولید HbF بعد از تولد به طرز شگفت آوری کاهش پیدا می ند اگر چه بعضی افراد به ساخت مقادیر کمی از HbF در تمام طول عمر خود ادامه می‌‌دهند.

هموگلوبین های جهش یافته:

Hbs :

Hb غالب در افراد مبتلا به آنمی داسی که زنجیره a نرمال است و جهش بیماریزا در زنجیره bوجود دارد که ساختار مولکولیa₂b₂ را ایجاد می کند. افرادی که یک ژن سیکل جهش یافته و یک ژن b نرمال دارند بیماری سیکل سل تریت دارند که خوش خیم است . Vat جایگزین Glu شده است. درسثمین aa.

Hbc :

ناشی از جهش درژن گلوبین b است و Hb غالب در افرادی که بیماری Hbc را دارند تشکیل می دهد. a₂b₂ بیماری Hbc آنمی همولتیک خفیفی ایجاد می کند و یک اسپلنو مگالی که نسبتا خوش خیم است aaGlu به جای Lys در ششمین aa درز b

HbE :

ناشی از جهش زنجیرهb گلوبولین است این افراد آنمی همولیتیک خفیف و اسپلنومگالی خفیف دارند . HbE تریت خوش خیم است . HbE در آسیای جنوب شرقی بسیار رایج است و در برخی مناطق از نظر فراوانی HbE با HbA برابر است . Ly جایگزین Glu درaa  ۲۶زنجیره bشده است.

Hb Constant :

Hb با پیچ خوردگی ثابت . Hb با جهش دائمی هموگلوبینی است که با جهش در ژن گلوبینa زنجیره گلوبین µ یی را ایجاد می کند که به طور ناهنجاری طویل است . مقدار این Hb در سلول ها به دو دلیل کم است :

دلیل اول مسنجر RNA (RNA پیامبر ) هموگلوبین Constantspring بی ثبات است .

دلیل دوم اینکه پروتئین زنجیره the.constant.spring خود بی ثبات است.

در نتیجه فنوتیپ تالاسمیک پدید می آید . نام The constant spering از ایزوله سابقه اختلال هموگلوبین Constant . spring در میان خاندانی با نژاد چینی در ناحیه Constant.spring جامائیکا برگرفته شده است .

HbH : تترامری مرکب از چهار زنجیره گلوبین است . HbH تنها با کمبود شدید زنجیره a ایجاد می شود . HbH در افرادی با سه ژن a تالاسمیا و به همان اندازه در افرادیکه ترکیب دوژن تالاسیما a حذفی و H.constant.s دارند یافت می شود .

Hb Barts:

در جنین با حذف چهار ژن a تالاسمیا به وجود می آید . اغلب افرادیکه حذف چهار ژن تالاسمی a و در نتیجه Hb Barts دارند و در دوران جنینی می میرند . Hb آنرمال با حذف چهارژن تالاسمیa که در طی رشد جنینی افراد دیده می شود را در بیمارستان ST بار سلو موس لندن تشخیص دادند. بیمارستان ملقب به St.Barts بود و هموگلوبین آنرمال را هم Hb Barts نامیدند.

حالات هتروزیگوس مرکب :

گفتیم Hb از دوزیر واحد مشتق از ژنهای خوشه ژنی aکه بر روی کروموزرم ۱۶ و دوزیر واحد مشتق از ژنهای b که روی کروموزوم شمار۱۱ قرار دارد تشکیل شده است . بعضی اوقات فردی دو تنوع ژنی متفاوت از خوشه ژنی aگلوبین و یا دو تنوع ژنی متفاوت از خوشه ژنی b گلوبین به ارث می برد . مثلا ژنی برای هموگلوبین S و ژنی برای HbC  این حالت را هتروزیگوس مرکب می گویند ماهیت دوژن وراثتی است که مشخص می کند آیا حالت بیماری مهم کلینیکی پدید آمده است یا نه حالات هتروزیگوس مرکب متمایل به گروه بندی از گروههای هموگلوبین متداول است ، مثلا Hbs/c که از اختلالات خوشه های هموگلوبینی جغرافیایی اطراف جهان نشات می گیرد .

بیماری Hbsc :

این بیماران یک ژن هموگلوبین S را از والدی و ژن هموگلوبین C را از والد دیگر به ارث می برد. Hbc و هموگلوبین S با فعل و انفعالات داخلی که دارند برخی ناهنجاری های معمول بیماری سیکل سل را ایجاد می کنند . به طور متوسط بیماران مبتلا به بیماری Hbsc علائم بیماری خفیف تریت از بیماران مبتلا به سیکل سل دارند . به هر حال این تنها یک میانگین است. برخی بیماران مبتلا به بیماری Hbsc عوارض سختی همانند بیماران مبتلا به سیکل سل دارند . تعدادی سندرم های دیگر نیز هستند . که مستلزم حالت هتروزیگوس مرکب Hbs می باشند. به هر حال این سندرم ها از بیماری Hbs/c کمتر رایج است . عجیب این است که اغلب بیماری Hbsc وضعیت بسیار سخت تری از بیماری Hbc هموزیگوس دارد .

.

فهرست مطالب : 

• مقدمه
• زمینه های عمومی : توصیف گروه بیماری
• ژن های و جهش های مولد بیماری :
• انواع Hbهای نرمال و غیر نرمال:
• همو گلوبینهای نرمال:
• هموگلوبین های جهش یافته:
• Hbs :
• Hbc :
• HbE :
• Hb Constant :
• Hb Barts:
• حالات هتروزیگوس مرکب :
• بیماری Hbsc :
• Sickle /beta.tha :
• HbE/beta thal :
• شیوه هایی برای شناخت ناقلین:
• متدهای هماتولوژی برای شناخت ناقلین :
• شیوه های اساسی هماتولوژی
• شمارش کامل گلبولهای سفید و قرمز خون
• روش پیشنهادی
• تفسیر نتایج
• توجه
• تجزیه الگوی هموگلوبین
• شیوه های شناخت احتمالی هموگلوبین آنرمال عبارتند از
• الکتروفورز Hb در ۶/۸
• الکتروفورز هموگلوبین در PH:6
• C) ایزوالکتریک فوکوتسینگIEF :
• d) کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا :
• توصیه ها :
• شمارش تعداد هموگلوبین A2:
• روش های شمارش تعداد هموگلوبین A2
• عبارتند از :
• کمیت سنجی هموگلوبین F:
• روش های کمیت سنجی ( شمارش تعداد) هموگلوبین F عبارتند از :
• a) مصنوعی سازی قلیا ( قلیایی کردن مصنوعی ) :
• b) HpLc:
• تفسیر نتایج :
• شیوه های تکمیلی هماتولوژی:
• وضعیت آهن
• a) پروتوپورفیرین روی Znpp:
• b) فریتین:
• Transferring.saturaction :
• تفسیر نتایج :
• سنتز زنجیره گلوبین:
• a) روش کروماتوگرافی CMC:
• b) HpLc:
• c) IEF:
• جداسازی زنجیره گلوبین :
• a) تست های Sickle :
• b) هاینز بادی :
• c) Oxygen.dissociation.curve :
• طیف سنجی گروهی : Mass . Spec trometry :
• روش اندازه گیری ایمنولوژیکال سلولهای F:
• MOLECULAR.DIAGNOSIS
• شناسایی جهش های معلوم :
• معایب Asodotbcot
• مزیت :
• REVERSE.DOT.BLOT.HYBRIDISATION(RDB)
• معایت RDB
• مزیت RDB
• ARMS (Am pli fication refractory.mutation.system)
• معایب
• مزیت
• Rest riction . enzjms _ Pcr
• معایبenzyme
• مزایا
• DGGE) Denaturing . gradiant.gel.electerophoresis)
• ژل الکتروفورز توام با شیب واسر شته سازی
• موازی
• عمودی
• معایب
• مزایا
• SSCP singhe . strand. conformation. polymorphism
• معایب
• مزایا
• Direct -SeguencingC(Automated)
• معایب
• مزایا
• منابع